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    技術文章/ ARTICLE

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    射頻功率放大器在腫瘤細胞表面EGFR研究中的應用

    更新時間:2023-04-27      瀏覽次數:160

    實驗名稱:超聲激活血卟啉對S180腫瘤細胞表面EGFR表達量的影響

    研究方向:生物醫療

    測試目的:

    血卟啉是從血紅蛋白中提取的有機光敏劑,其本身無抗腫瘤效應,但它可以在動物和人的多種腫瘤組織優先聚集,易為聲光輻射處理激活,當它被聲光激活后能產生強烈的抗腫瘤效應。美國利用光激活治療腫瘤,這種方法被稱為光動力學療法,簡稱PDT。光動力學療法在臨床主要應用于人體表面淺層腫瘤的治療。光在生物組織中的穿透能力差,使其對深部腫瘤的治療受到限制。超聲聯合血卟啉對小鼠移植腫瘤生長抑制有協同效應,發現單用血卟啉無抑制作用,單用超聲僅有輕微抑制作用,而兩者聯合則有明顯的抑制效果,并將之命名為聲動力學療法。超聲是一種彈性機械波,其在生物組織中的穿透能力比激光強,同時超聲能夠聚焦于特定部位。聲動力療法對于治療腫瘤細胞有較強的針對性,對正常組織無創傷,組織穿透力強,并且機體不產生耐受性,可以反復多次治療,因而它對于治療腫瘤,特別是組織深層腫瘤有著較好的應用前景。有學者認為SDT殺死或抑制腫瘤細胞的部分機理是通過超聲的熱效應來實現的,但是大量的實驗結果提示,SDT可能更主要地與超聲激活聚集在癌組織的血卟啉產生單線態氧有關。

    測試設備:ATA-8202射頻功率放大器、昆明系小白鼠、艾氏腹水腫瘤細胞系、超聲探頭、細胞色素c和Bax單克隆抗體、caspase-3單克隆抗體、鏈霉卵白素SP試劑盒。

    實驗過程:

    接種:S180腹水瘤細胞于6只小鼠腹腔1周后,隨機取3只小鼠,抽取腹水細胞,分別置于醫用薄壁試管,加入RPMI1640+10%小牛血清培養基中,于37℃孵箱培養,實驗時用生理鹽水調整細胞濃度至2x106個/ml。每只小鼠抽取的腹水細胞分為12管,分為四組,分別為對照組(CT)、血卟啉組(H)、超聲組(U)和超聲加血卟啉組(UH),每組三管,每管0.5ml細胞懸液。H組和UH組每管中加入血卟啉4ul,使其終濃度為0.01mg/ml,37℃CO2孵箱孵育,45min后U組和UH組分別在頻率為1.8MHz,強度為2W/cm2的超聲裝置中聲照處理3min,各實驗組分別于聲照后1h、3h、5h取材,常規細胞涂片。

    免疫組織化學染色:以SP法進行免疫組織化學染色:細胞涂片固定后加3%過氧化氫處理15min,除去內源性酶PBS洗3次,加正常動物血清30min以減少非特異性染色,加EGFR一抗4℃過夜,PBS代替一抗作為陰性對照。SP染色按試劑盒說明進行,DAB顯色,梯度酒精脫水,中性樹膠封固蓋片。

    陽性結果觀察:各組隨機選取10個高倍視野,利用數碼顯微成像系統進行圖像采集和分析。ImagePro-Plus5.0圖像分析軟件測定各組照片的平均光密度OD值(0~255)(用平均光密度表示陽性細胞表達強度,平均光密度值越大則表達越強)。組間t檢驗顯示組間差異。

    實驗結果:

    由表中數據可以看出,超聲激活血卟啉處理1h后,UH組、U組平均光密度值明顯低于CT組、H組,且UH組平均光密度值低于U組,經組間t檢驗,UH組與其它組差異極顯著(p<0.01);超聲激活血卟啉處理3h后,uh組平均光密度值小幅度下降,ct組、h組基本無變化,u組平均光密度下降,經組間t檢驗,uh組與可組差異顯著(p>

    表1EGFR在超聲處理1h、3h、5h后平均光密度值比較(*10-2)

    圖1EGFR在超聲處理1h、3h、5h后平均光密度值比較(*10-2)

    安泰ATA-8202射頻功率放大器:

    本文實驗素材由西安安泰電子整理發布。西安安泰電子是專業從事功率放大器、高壓放大器、功率信號源、前置微小信號放大器、高精度電壓源、高精度電流源等電子測量儀器研發、生產和銷售的高科技企業。Aigtek已經成為在業界擁有廣泛產品線,且具有相當規模的儀器設備供應商,樣機都支持免費試用。



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